Chemisches und Veterinäruntersuchungsamt Karlsruhe
Lebensmittelüberwachung und Tiergesundheit im Regierungsbezirk Karlsruhe
Neuer molekularbiologischer Neosporanachweis
Am CVUA Karlsruhe ist ein Realtime-PCR Protokoll als ein weiterer Parameter in der Abortdiagnostik bei Rindern entwickelt worden.
Im PCR-Labor des CVUA Karlsruhe werden neben der herkömmlichen PCR-Methode viele Parameter mittels Realtime-PCR (PCR = Polymerase-Chain-Reaction) untersucht. Bereits seit mehr als zwei Jahren wird Abortmaterial auf Neospora caninum routinemäßig untersucht. Dieser einzellige Parasit besitzt als Aborterreger in den Rinderherden eine wichtige wirtschaftliche Bedeutung.
Aufgrund eines allgemein einheitlichen Temperatur-Zeit-Protokolls lassen sich bei dieser Methode mehrere Parameter einer Probe mittels PCR gleichzeitig bearbeiten. Zusätzlich wird mittels Fluoreszenzsondentechnik der jeweils exakte Wert amplifizierter DNA jederzeit angegeben. Beim Mitführen einer standardisierten Probenreihe ist eine exakte Quantifizierung des analysierten Genoms möglich. Das bei der herkömmlichen PCR-Technik sich anschließende elektrophoretische Auftrennen der PCR-Produkte sowie das Anfärben mit dem gesundheitsschädlichen Ethidiumbromid entfällt.
Bisher stand eine Methode zur Detektion von Neospora caninum mittels Realtime-PCR (Taqman-Sonden) nicht zur Verfügung. 2005 wurde ein Taqman-Sonden-Protokoll zum Nachweis von Neospora caninum erarbeitet. Vergleichsuntersuchungen mit publizierten Methoden (SybrGreen) und der erfolgreiche Einsatz in der Routinediagnostik bestätigten die Praxisreife. Zusammen mit anderen potentiellen Aborterreger (wie z.B. Chlamydien und Coxiellen) lässt sich die Untersuchung auf Neospora caninum in einen gemeinsamen PCR-Lauf integrieren und die Untersuchungszeit sowie der zeitliche Aufwand deutlich verkürzen.
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